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Wnt合成分泌和配體信號(hào)的分子機(jī)制,胎牛血清助力生物學(xué)研究

更新時(shí)間:2023-10-22  |  點(diǎn)擊率:490

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要方向,需要以細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,澳洲血源,內(nèi)毒素含量≤3EU/ml,助力細(xì)胞學(xué)研究。

 

Wnt信號(hào)是一個(gè)基本的信號(hào)級(jí)聯(lián),在人類發(fā)育和發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。異常的Wnt信號(hào)經(jīng)常與各種癌癥密切相關(guān)。Wnt信號(hào)是由分泌的脂質(zhì)修飾信號(hào)糖蛋白Wnt與其卷曲(FZD)受體及其共受體之間的相互作用觸發(fā)的。 Wnt在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)中合成,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的膜結(jié)合o-?;D(zhuǎn)移酶Porcupine (PORCN)將單不飽和棕櫚油酸酯部分(PAM)轉(zhuǎn)移到Wnt蛋白發(fā)夾2上的保守絲氨酸殘基上。先前的一項(xiàng)研究表明,棕櫚?;瘜?duì)于Wnt的分泌是很重要的,關(guān)鍵絲氨酸的突變或PORCN活性的喪失都會(huì)導(dǎo)致Wnt滯留在ER中。脂化后,膜蛋白Wntless (WLS)利用其胞外結(jié)構(gòu)域和跨膜區(qū)域與修飾的Wnt結(jié)合。這種相互作用促進(jìn)了Wnt在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸。

 

已經(jīng)鑒定出19種人類Wnt配體通過(guò)旁分泌和自分泌系統(tǒng)激活不同的信號(hào)通路人類Wnt蛋白含有至少22個(gè)半胱氨酸殘基,這些殘基形成多個(gè)二硫鍵,有助于Wnt的穩(wěn)定性和折疊。脂化Wnt配體由于其疏水性,通常在水環(huán)境中表現(xiàn)出低溶解度,因此在Wnt生產(chǎn)過(guò)程中需要蛋白質(zhì)伴侶。在所有后生動(dòng)物中,Wnt脂化和細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)鍵過(guò)程分別由PORCNWLS兩種膜蛋白介導(dǎo)。這意味著存在一個(gè)支配Wnt生產(chǎn)的普遍原則。

 

Wnt分泌的一種可能模式涉及直接釋放到細(xì)胞外空間。

首先,Wnt-WLS復(fù)合物通過(guò)高爾基體從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)移動(dòng)到質(zhì)膜。一旦Wnt- wls復(fù)合物到達(dá)細(xì)胞表面,Wnt分子就與排泄它們的細(xì)胞上的受體結(jié)合(自分泌信號(hào))或與鄰近細(xì)胞結(jié)合(旁分泌信號(hào))。這一過(guò)程可能涉及Wnt分子向各種實(shí)體的轉(zhuǎn)移,如細(xì)胞表面蛋白聚糖和可溶性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

另一種模型表明,Wnt-WLS復(fù)合物在定位到質(zhì)膜后,經(jīng)歷內(nèi)吞作用和隨后在內(nèi)體腔室內(nèi)解離。這就允許Wnt被裝載到外泌體上進(jìn)行分泌關(guān)于WntWLS解離的各種假設(shè)提出,低pH調(diào)節(jié)Wnt的釋放,特定脂質(zhì)與WntWLS中的棕櫚油基部分競(jìng)爭(zhēng),或者膜曲率的改變促進(jìn)了Wnt的釋放。

然而,有限的實(shí)驗(yàn)證據(jù)支持這些提出的機(jī)制;因此,WntWLS釋放的分子決定因素仍然難以捉摸。

 

近日,科研人員發(fā)現(xiàn)鈣網(wǎng)蛋白(CALR)是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中Wnt蛋白的糖聚糖伴侶。

 

相關(guān)研究發(fā)表在《Cell》上,文章標(biāo)題為:“Molecular basis of Wnt biogenesis, secretion and Wnt7 specific signaling"。

 

研究結(jié)果還表明,將磷脂摻入WLS可以增強(qiáng)Wnt蛋白的募集。在WLS載脂蛋白狀態(tài)下,TMs 6-7的構(gòu)象發(fā)生改變,阻斷了WLSWnt蛋白中中心磷脂的結(jié)合位點(diǎn),提示脂質(zhì)介導(dǎo)Wnt釋放的機(jī)制。此外,我們已經(jīng)確定了與Wnt7a結(jié)合的RECK的結(jié)構(gòu),揭示了RECKCC4結(jié)構(gòu)域?qū)τ诮Y(jié)合Wnt7a激活Wnt配體特異性信號(hào)至關(guān)重要。


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