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細(xì)胞支原體污染的檢測(cè)方法和預(yù)防措施

更新時(shí)間:2023-10-20  |  點(diǎn)擊率:439
  細(xì)胞支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的一種污染問題。支原體是一類微生物,以細(xì)胞內(nèi)寄生的方式存在,可以感染多種細(xì)胞類型,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響。
  

 

  細(xì)胞支原體污染原因:
  
  1.源頭污染:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中使用的細(xì)胞系或原代細(xì)胞可能攜帶有支原體,如果沒有經(jīng)過篩查和消毒處理,可能會(huì)引入支原體污染。
  
  2.實(shí)驗(yàn)操作不當(dāng):如操作人員沒有穿戴合適的個(gè)人防護(hù)設(shè)備、操作臺(tái)面和器具未經(jīng)消毒、容器密封不嚴(yán)等都可能導(dǎo)致支原體的傳播和污染。
  
  3.檢測(cè)和鑒定不準(zhǔn)確:傳統(tǒng)的檢測(cè)方法可能無法準(zhǔn)確鑒定細(xì)胞中的支原體,從而導(dǎo)致未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理污染。
  
  檢測(cè)方法:
  
  1.PCR檢測(cè):通過擴(kuò)增支原體特異性基因片段進(jìn)行檢測(cè),具有高靈敏度和特異性,可以檢測(cè)到低濃度的支原體污染。
  
  2.細(xì)胞培養(yǎng)法:將待測(cè)細(xì)胞接種至選擇性培養(yǎng)基中,觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況,如出現(xiàn)細(xì)胞變形、聚集等異?,F(xiàn)象,可能提示存在支原體污染。
  
  3.免疫熒光染色法:利用特異性抗體與支原體抗原結(jié)合,通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞中的支原體標(biāo)記物,快速準(zhǔn)確地確定支原體感染情況。
  
  4.電子顯微鏡觀察:通過電子顯微鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行觀察和分析,以發(fā)現(xiàn)支原體的存在和形態(tài)特征。
  
  細(xì)胞支原體污染預(yù)防控制措施:
  
  1.嚴(yán)格篩查源細(xì)胞:在使用細(xì)胞系或原代細(xì)胞前,對(duì)供應(yīng)商提供的細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)的篩查和檢測(cè),確保無支原體污染。
  
  2.個(gè)人防護(hù):操作細(xì)胞時(shí),操作人員應(yīng)穿戴合適的個(gè)人防護(hù)設(shè)備,如實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩等,以減少污染的傳播。
  
  3.器具消毒:實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)器具、培養(yǎng)皿等應(yīng)經(jīng)過清洗和高溫蒸汽消毒,確保無支原體殘留。
  
  4.環(huán)境控制:保持實(shí)驗(yàn)室的空氣流通和清潔,定期對(duì)操作臺(tái)面、儀器設(shè)備進(jìn)行消毒和清潔,減少支原體的滋生和傳播。
  
  5.定期檢測(cè):采用敏感、快速和準(zhǔn)確的檢測(cè)方法,定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室中的細(xì)胞系和原代細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),早期發(fā)現(xiàn)和處理支原體污染。
  
  6.隔離措施:對(duì)已經(jīng)檢測(cè)出支原體污染的細(xì)胞進(jìn)行隔離處理,防止其傳播給其他細(xì)胞系或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物。
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