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原代細(xì)胞體外培養(yǎng),揭示病毒如何進(jìn)出鼻腔

更新時(shí)間:2023-02-17  |  點(diǎn)擊率:698

 SARS-CoV-2導(dǎo)致了疾病大流行。

病毒刺突糖蛋白(SP)與宿主受體結(jié)合后,血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2 (ACE2)和宿主跨膜絲氨酸蛋白酶2 (TMPRSS2)啟動(dòng)SP促進(jìn)病毒融合,病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞并開(kāi)始復(fù)制。病毒復(fù)制已在組織培養(yǎng)中建模。然而,SARS-Cov-2復(fù)制的主要部位是上呼吸道,這是專門為病毒感染創(chuàng)造屏障的。事實(shí)上,病毒細(xì)胞進(jìn)入、退出以及在氣道上皮細(xì)胞間傳播的機(jī)制尚不清楚。

近日,發(fā)表在《Cell》上,標(biāo)題為:“Cell-cell metabolite exchange creates a pro-survival metabolic environment that extends lifespan"的文章中,報(bào)告了一項(xiàng)新研究。

研究人員利用原代鼻上皮類器官培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)病毒通過(guò)ACE2受體附著在活動(dòng)纖毛上。SARS-CoV-2穿過(guò)黏液層,利用活動(dòng)纖毛作為通道進(jìn)入細(xì)胞體。纖毛減少可以阻止SARS-CoV-2和其他呼吸道病毒的感染。SARS-CoV-2子代在感染24小時(shí)后附著在氣道微絨毛上,并引發(fā)頂端延伸和高度分枝的微絨毛的形成,這些微絨毛組織病毒從微絨毛出口回到黏液層,支持病毒通過(guò)粘液纖毛運(yùn)輸在氣道組織中擴(kuò)散的模型。

磷酸化蛋白組學(xué)和激酶抑制研究表明,微絨毛重塑是由p21活化激酶(PAK)調(diào)控的。重要的是,Omicron變體與運(yùn)動(dòng)纖毛具有更高的親和力,并顯示出加速病毒進(jìn)入。

研究表明,活動(dòng)纖毛、微絨毛和黏液纖毛依賴的黏液流動(dòng)對(duì)于病毒在鼻上皮細(xì)胞中的高效復(fù)制至關(guān)重要。

本實(shí)驗(yàn)中,利用了原代細(xì)胞的體外培養(yǎng)。原代細(xì)胞體外培養(yǎng)難度大,易污染。需要高品質(zhì)的胎牛血清,對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行滋養(yǎng)。Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,品質(zhì)優(yōu)異,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表現(xiàn)良好,為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。


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