在細胞培養(yǎng)實驗中，血清無疑成為影響實驗成功與否的重要因素，而在眾多血清之中，牛血清是最為常用的。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，其中含有豐富的細胞生長所必須的營養(yǎng)成分，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì)，多肽類，激素類，其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

哪些情況下，要對血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選

1.養(yǎng)干細胞時，干細胞對內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進行試用。

2.養(yǎng)免疫細胞時，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗，培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細胞衰老或凋亡的試劑，都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準備血清和其他試劑時，選擇極低的內(nèi)毒素（最好≤1EU/ml），對實驗至關(guān)重要；

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉(zhuǎn)染，或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增，這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此，挑選更低的內(nèi)毒素，是保證實驗順利的第一步。

5.實驗室有些細胞，需要長期培養(yǎng)、長期凍存，或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的，血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清，以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。

總之，血清中內(nèi)毒素含量過高，更容易導(dǎo)致細胞“亞健康”，造成數(shù)據(jù)不準，或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡，導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

細胞培養(yǎng)學(xué)會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名。

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前，均經(jīng)過嚴格質(zhì)控，每個批次附有詳細完整的《檢測報告》，包括：品名，貨號，批號，血源地，生產(chǎn)日期，保質(zhì)期，pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查（細菌、真菌、支原體）、病毒檢查（如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應(yīng)等）、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清，應(yīng)認真審閱《檢測報告》，做好試用前篩選第一步。（如何看懂《檢測報告》，可登陸“締一生物”網(wǎng)站，留言技術(shù)部，得到免費幫助。）

 

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