国产精华推荐2021,欧美性BBBBBXXXXXXX,国产乱妇无乱码大黄aa片,国产97在线 | 中文

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細胞凋亡檢測實驗

細胞凋亡檢測實驗

更新時間:2022-04-27  |  點擊率:636

細胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質(zhì)膜。當細胞壞死時,質(zhì)膜不完整,PI就進入細胞內(nèi)部,它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細胞著色,凋亡細胞和活細胞不著色。而一些活細胞染料由于為親脂性物質(zhì),可跨膜進入活細胞,因而可進行活細胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱,它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結(jié)合(主要結(jié)合于A-T)堿基區(qū)),顯示凋亡細胞和活細胞。凡是看到有凋亡小體的細胞都是凋亡細胞。


一、試劑準備

1. 三尖杉酯堿(HT):300μg/ml;
2. Tris-HCl(pH7.5):100mmol/L;
3. EDTA緩沖液:5mol/L;


4. 堿性裂解液:0.2mol/L NaOH;
5. 醋酸鈉:3mol/L KAc(pH4.8);
6. PI母液:500μg/ml;
7. Ho33342母液:2mmol/L;
8. 人早幼粒白血病HL-60細胞:用含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基在37℃,5% CO2條件下培養(yǎng)。
9. 其他:異丙醇、1%SDS、70%乙醇、溴酚藍、蔗糖指示劑、TBE電泳緩沖液、1%瓊脂糖、溴乙錠。

二、三尖杉酯堿誘發(fā)HL-60細胞凋亡

1. 實驗前約24小時,接種兩瓶HL-60細胞,標記①、②,每瓶含約6 ml培養(yǎng)液,置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2. 實驗前約2.5小時,當細胞密度達到70%,①號瓶加入三尖杉酯堿200 μl,使終濃度為1 μg/ml,②號瓶中加入同等量PBS(pH7.4)作對照。共同放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)2.5小時。

3. Ho33342和PI雙重染色鑒別三種細胞

(1)染色:將瓶中的細胞搖勻取200 μl于1.5 ml的離心管中,加入Ho33342母液2 μl,PI 20 μl,染色15分鐘。

(2)滴片:取一載玻片用雙面膠圍成一小室,從離心管中各取以上染色后的細胞懸液10 μl,加入小室內(nèi)蓋上蓋玻片,熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀察,區(qū)別三種細胞,并注意三者比例。


注意事項

1. 誘導培養(yǎng)HL-60細胞時間要準確;

2. 熒光顯微鏡下觀察細胞時,由于熒光易碎滅,觀察時要盡量快。


Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴格質(zhì)控,每個批次附有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞病變效應(yīng)等)、促細胞生長能力、細胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清,應(yīng)認真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測報告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費幫助。)


它在國內(nèi)市場經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶反復選擇,也是細胞典藏等重大項目十幾年的供應(yīng)品牌


蜜芽AV人妻久久无码精品| 西瓜视频高清在线观看免费 | 精品国产一区二区三区av| AV大片在线无码永久免费| 亚洲精品一区久久久久久| 欧美又大粗又爽又黄大片视频| 青青草视频在线观看| 久久亚洲国产成人精品无码区| 欧美三级在线播放| 久久久久久人妻一区精品| 真人做人60分钟啪啪免费看| 男人狂躁进女人下面免费视频| 好男人网官网在线观看2019| 亲嘴揉胸口激烈视频| 久久成人国产精品免费软件| 国产sm调教视频在线观看| 日本55丰满熟妇厨房伦| 久久精品中文骚妇内射| 中文资源在线官网| 国产麻豆一精品一av一免费| 免费av在线看| 女邻居丰满的奶水在线观看| 成全视频免费高清观看在线| 亚洲欧美国产精品专区久久| 成在人线av无码免费| 亚洲乱码国产乱码精品精| 黑人粗进入欧美| 成熟丰满熟妇高潮xxxxx视频 | 亚洲 欧美 中文 日韩| 亚洲熟妇色XXXXX欧美老妇| 亚洲色婷婷久久精品av蜜桃| 九九无码人妻一区二区三区 | 久久久久亚洲精品无码网址| 日本一区二区三区不卡视频| 极品尤物一区二区三区| 国产伦视频电影网站| 中文字幕亚洲情99在线| 国产精品免费a v片在线观看| 欧美三级在线播放| 亚洲国产精品热久久| 久久人做人爽一区二区三区|