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血清質(zhì)量的鑒定一般包括哪幾個(gè)方面

更新時(shí)間:2021-11-23  |  點(diǎn)擊率:740

理化性質(zhì):如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內(nèi)毒素等。蛋白含量包括血清總蛋白含量(不低于35-45g/L)、球蛋白含量(應(yīng)小于20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一項(xiàng)非常重要的指標(biāo),血清中球蛋白主要是抗體,球蛋白含量越低血清質(zhì)量越高。血紅蛋白也是越低越好。

微生物檢測(cè):包括細(xì)菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對(duì)支原體、病毒的檢測(cè),支原體是一種很小的微生物,可通過(guò)孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光學(xué)顯微鏡下難于察覺(jué),細(xì)胞也能生長(zhǎng)繁殖,但會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。檢測(cè)支原體的方法很多,如培養(yǎng)法、PCR法、熒光染色法、電鏡觀察法等。

促生長(zhǎng)效果:這是血清重要的特性之一,應(yīng)當(dāng)以培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)檢測(cè)。有兩種方法:克隆形成率、貼瓶率測(cè)定法和連續(xù)傳代培養(yǎng)法。

(1)克隆形成率測(cè)定:一般以懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞為培養(yǎng)對(duì)象,按有限稀釋法做克隆化培養(yǎng),將不同批號(hào)的血清配制成不同濃度的培養(yǎng)基,細(xì)胞也稀釋成不同濃度,接種到96孔板,每孔200ul,培養(yǎng)一定時(shí)間,統(tǒng)計(jì)有克隆生長(zhǎng)的孔,計(jì)算出百分比,再與對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)血清相比較,就可看出不同批號(hào)血清間的區(qū)別。比較低的濃度,更能觀察出血清質(zhì)量間的細(xì)微差別。

(2)貼瓶率測(cè)定:是以貼壁細(xì)胞為培養(yǎng)對(duì)象,將細(xì)胞稀釋至低密度,接種至平皿,每皿200或100個(gè)細(xì)胞,以不同濃度的血清培養(yǎng)基培養(yǎng),培養(yǎng)一定時(shí)間后棄培養(yǎng)基,染色后統(tǒng)計(jì)集落數(shù),計(jì)算出集落數(shù)占接種細(xì)胞數(shù)的百分比,同樣再與標(biāo)準(zhǔn)血清比較,判斷血清質(zhì)量高低。

(3)連續(xù)傳代培養(yǎng)法:是將細(xì)胞培養(yǎng)于3個(gè)一定體積的培養(yǎng)瓶中,待測(cè)血清配制為5%濃度,一般于第七天收集細(xì)胞,計(jì)數(shù),取平均值,中間可以更換一次培養(yǎng)基。連續(xù)測(cè)試三個(gè)周期以上,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況,并將每次的計(jì)數(shù)結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)血清的測(cè)試結(jié)果比較。

對(duì)于使用者,判斷血清質(zhì)量先從外觀入手。好的血清應(yīng)該是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁、不透明、含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若血清呈棕紅色,說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高,取材時(shí)有溶血現(xiàn)象;如果搖晃時(shí)感覺(jué)液體稀薄,說(shuō)明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進(jìn)一步了解血清的質(zhì)量,則應(yīng)連續(xù)培養(yǎng)某些細(xì)胞,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。

科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

Ausbian®特級(jí)胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控,每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測(cè)報(bào)告》,包括:品名,貨號(hào),批號(hào),血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無(wú)菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長(zhǎng)能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實(shí)驗(yàn)人對(duì)于新批次血清,應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測(cè)報(bào)告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測(cè)報(bào)告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費(fèi)幫助。)


它在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶(hù)反復(fù)選擇,也是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的供應(yīng)品牌.


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