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如何保證血清活性?解凍和儲(chǔ)存方法很重要!

更新時(shí)間:2021-10-22  |  點(diǎn)擊率:856

剛到貨的血清應(yīng)該怎樣儲(chǔ)存?

血清到底要怎樣解凍才能保證活性?

血清在4℃冰箱能放多久?

作為一名細(xì)胞培養(yǎng)大戶,你是不是經(jīng)常會(huì)糾結(jié)上面這些問(wèn)題?畢竟血清這種金貴的東西,可得好好珍惜,一個(gè)不小心,就可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,免不了要被導(dǎo)師責(zé)備。

那這些問(wèn)題到底應(yīng)該怎樣解決?有沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)答案?身為一個(gè)資深的代理商,關(guān)于血清的儲(chǔ)存和解凍問(wèn)題我們可是有好好研究過(guò)的。

如果你也存在同樣的疑惑,那就請(qǐng)接著往下看吧。


常規(guī)儲(chǔ)存

首先,剛到貨的血清,趁著它還凍手,趕緊放進(jìn)-20℃冰箱中,避免反復(fù)凍融。當(dāng)然,如果你的課題組不差錢(qián),-80℃冰箱空間充足,把血清儲(chǔ)存進(jìn)去也是沒(méi)有問(wèn)題的。


如何解凍

很多同學(xué)會(huì)說(shuō),不就是解凍血清嘛,這題我會(huì)!

放4℃過(guò)夜

emmm……怎么說(shuō)呢,直接在4℃冰箱里過(guò)夜融化的方法,雖然很多人在這么用,但還是有一些潛在的風(fēng)險(xiǎn)的。

我們都知道,在血清這種混合物中,融化速度:蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類溶劑,所以蛋白質(zhì)會(huì)*溶解析出,而水還是結(jié)成冰的狀態(tài),導(dǎo)致瓶子中間會(huì)出現(xiàn)一根透明的冰柱,而周圍則會(huì)呈現(xiàn)上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài),在使用過(guò)程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過(guò)高等問(wèn)題,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

更重要的一點(diǎn)是,血清中珍貴的生長(zhǎng)因子等活性物質(zhì),它們?cè)诮鈨鲞^(guò)程中,有著與細(xì)胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷,都需要快速解凍才能較大程度地保留生物活性。顯然,4℃過(guò)夜這樣的長(zhǎng)時(shí)間處理,很有可能會(huì)導(dǎo)致一部分「營(yíng)養(yǎng)成分」的損失,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。




所以,為了更好地保留血清中的活性成分,使細(xì)胞培養(yǎng)更穩(wěn)定,我們推薦使用三步法溶解,具體方法見(jiàn)下表,有需要的同學(xué)可以截圖保存。

如果是儲(chǔ)存在-80℃的血清,則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中(至少24小時(shí)),再使用三步法溶解,避免溫差過(guò)大使血清失活。


注:此方法國(guó)際通用,適用于所有培養(yǎng)基,在水浴過(guò)程中,血清的平面要*浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身,使血清混勻,但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫!

*解凍血清后,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲(chǔ)存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候,再?gòu)?20℃冰箱中取出一管來(lái)解凍使用(最好能全部配成培養(yǎng)基,不要有剩余),可以有效避免反復(fù)凍融的問(wèn)題(遵循現(xiàn)用現(xiàn)配、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則)。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲(chǔ)存。


4℃存放時(shí)間

看到這里,問(wèn)題又來(lái)了,配好的培養(yǎng)基,或者剩下的那一點(diǎn)點(diǎn)血清,能在4℃冰箱里放多久呢?

先給出我們認(rèn)為比較合理的答案,再來(lái)解釋原因:

7

一般情況下,已經(jīng)解凍的血清,無(wú)論是配成*培養(yǎng)基還是在冰箱里備用,都不要超過(guò)一周(7天),原因也很簡(jiǎn)單,存放太久,生長(zhǎng)因子等物質(zhì)容易失活,而且比較容易受到污染,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

不知道今天這期內(nèi)容有沒(méi)有解決大家的疑惑,無(wú)論是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都不算便宜,這么貴巴巴的試劑,還請(qǐng)小心使用,讓它們的功效倍增,可不能讓銀子白花!



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