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DIY判斷細胞的支原體污染

更新時間:2021-09-27  |  點擊率:1022

 

細菌真菌污染還有跡可循,起碼顯微鏡下能夠清晰地看到,但是支原體個子小,不易觀察,由于繁殖速度比較慢,期感染幾乎沒有癥狀。經(jīng)常稍不留意,就中了支原體的「陰招」。統(tǒng)計顯示,全球大約有60%左右的細胞培養(yǎng)存在或曾經(jīng)存在過支原體污染


癥狀1:細胞生長緩慢甚至死亡?

被廣泛使用的細胞培養(yǎng)基,不僅給細胞提供支持和養(yǎng)分,對于支原體而言,也是天堂一般的存在。

 

與細胞培養(yǎng)高度重合的培養(yǎng)條件,注定了支原體要與細胞共同競爭有限的生存資源。

 

早有研究表明[1],一些支原體(包括為常見的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當(dāng)這些支原體混入細胞培養(yǎng)體系后,會與細胞爭精氨酸,導(dǎo)致細胞「吃不飽飯」,出現(xiàn)營養(yǎng)不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。

而精氨酸又是細胞組蛋白的重要組成成分,缺乏精氨酸會嚴(yán)重影響組蛋白合成,引起染色體斷裂。再加上細胞處于長qi饑餓的狀態(tài),終導(dǎo)致細胞生長變慢甚至死亡


  支原體感染癥狀2:細胞變形、碎片增加、易聚團、有小黑點?

 

經(jīng)過支原體的這一番操作,細胞結(jié)構(gòu)已經(jīng)被嚴(yán)重破壞,隨之而來的就是細胞形態(tài)改變、細胞易聚團、大面積細胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培養(yǎng)基中的碎片和小黑點)

 

圖片


 

支原體也是如此——當(dāng)培養(yǎng)體系中感染了支原體并大量繁殖的時候,會向外排放代謝產(chǎn)物,影響體系中的PH,加快培養(yǎng)基變黃的速度。


                                                             支原體感染癥狀3:培養(yǎng)基易變黃?

綜上所述,如果你培養(yǎng)的細胞出現(xiàn)以下情況,基本可以確定是支原體感染了,不放心的話可以再配合支原體檢測試劑檢測神器幫你揪出培養(yǎng)基中的支原體!進一步確認。

 


除了影響細胞活力,支原體還會給細胞帶來的幾百種基因表達的改變,包括編碼受體、離子通道、生長因子的基因和癌基因等方面[4]。它包含高度富含免疫原性的脂蛋白,可以錨定在胞膜的外表面,被TLR2等免疫細胞的受體識別。激活NF-kB途徑,進一步導(dǎo)致細胞活化[5],偏離終的實驗結(jié)果

 

細胞培養(yǎng)小課堂到這里就結(jié)束了,希望可以幫你解決實驗上的一些疑惑!





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