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微生物法測定葉酸含量的改進

更新時間:2018-09-11  |  點擊率:1698

葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素,微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比,微生物法具有許多優(yōu)點:樣品預(yù)處理簡單、對設(shè)備要求不高、成本低廉等。

 

許多機構(gòu)都將微生物法作為葉酸分析的標準方法,我國國家標準《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應(yīng)用 96 孔細胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對葉酸進行微量檢測,將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標板相結(jié)合,使得測定時間大為縮短。菌株對多數(shù)葉酸形式反應(yīng)相似,能測定單和多谷氨酸葉酸,靈敏度很高,能達到ng 水平,具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。

 

這一方法對菌種的處理、分裝和保存,以及操作過程都作了重大改進,已被認為是目前可靠、簡便、迅速和微量檢測葉酸的方法。

 

 

 

96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準確、可靠、重復(fù)性好的結(jié)果。稀釋倍數(shù)對測定結(jié)果影響不大,結(jié)果穩(wěn)定??紤]其成本低廉,樣本預(yù)處理簡單以及對設(shè)備要求不高等優(yōu)點,適合于大批量測定,可用于大樣本的血液流行病學研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定,這對國內(nèi)開展葉酸檢測有著較大的意義。

 

應(yīng)用96孔板法測定葉酸含量時,選擇測定用葉酸培養(yǎng)基,這里推薦的是上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測定用培養(yǎng)基(貨號:M543),該培養(yǎng)基由Himedia Laboratories生產(chǎn),嚴格遵循標準,國產(chǎn)葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸,易導(dǎo)致測定結(jié)果偏高,實驗準確性比較差,HiMedia葉酸測定用培養(yǎng)基有認證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書,成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標準 食品中葉酸的測定》,測定結(jié)果準確性高。

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